examen bioquimico de glucosa en orina
GLUCOSURIA
Presencia de glucosa en orina
CAUSAS
-hiperglicemia
--diabetes mellitos
-dificultad de reabsorcion tubular renal
-sindrome de fanconi
-Trastornos de la glucoregulacion nerviosa
-DETERMINACION DE SUSTANCIAS REDUCTORAS
Fundamento
azucares reductores
slo. alcalina ...............iones cupricos ....oxido cuproso
calor
La reaccion produce un viraje de color azul al anaranjado al verde
Depende de la concentracionde sustancias reductoras presente en
la orina
TABLETAS CLINITET
Se enplea en la determinacion de sustancias reductoras
REACTIVO
*sulfato de cobre
*ac. Citrico
*NaOH
*cabonato de sodio
TECNICA
*en un tubo de ensayo colocar 5 gotas de orina
*10 gotas de H2Od mezclar y ajitar
*agregar una tableta de clinetest y observar la reaccion conpleta
{no ajitar el tubo hasta despues de 15 segundos )
*calentar hasta ebullicion, pasados los 15 seg. Ajitar el tubo suabemente
Para conparar el color obtenido con los colores de la carta
LECTURA
*NEGATIVO.- 1/4%
*TRAZAS ½%
*1+ ¾%
*2+ 1%
*3+ 2%
*4+ color anaranjado brillante al marron oscuro
Verdoso
REDUCCION DE GLUCOSA OXIDASA
Tiras reactibas detecta solo glucosa
glucosa oxidasa
Glucosa +O2 ...... ..ac gluconico+H2O2
peroxidasa
H2O2 + cromogeno ........... cromogeno oxidado + H2O2
NOTA.- el cromogeno utilisado varia con los diferente tiras reactivas
*a los 100gm/dl se lee al minuto
*valores superiores a los 5 minutos
OBSERBACIONES
*FASOS POSITIVOS
-Mx contaminada con H2O2
-hipoclorito
-FALSOS NEGATIVOS
-VITAMINA C inhibe la reaccionencimatica dando lugar a una
lectura con valores redusidos o a un fenomeno negativo
DETERMINACION CUALITATIVA DE GLUCOSA
*METODO FEHLING
Se basa en reduccion de sales de cobre por accion de la glucosa
[medio alcalino por ebullicion)
REACTIVOS
•Solucion A.- sulfato de cobre
*solucion B.- tartrato de sodio o potacio
TECNICA
*en un tubo de ensayo colocar 5ml de reactivo
*8 gotas de orina
*calentar por 2 minutos
*dejar enfriar lentamente
LECTURA
*negativo.-presipitado azul claro
*TRAZAS.- verde azulado
*1+ presipitado verde amarillo
*2+ presipitado amarillo verde
*3+ presipitado amarillo anaranjado
*4+ presipitado rojo ladrillo
NOTA .- el prosedimiento es muy sensible y pueden detectarse
valores hasta de 0.02 %
OBSERBACIONES
*POSITIVOS ALTOS
-glucoronidos
Farmacos
FALSOS NEGATIVOS
-si el prosedimiento no a sido realisado correctamente
METODO DE BENEDICT
Basado tanbien en la accion reductora de la glucosa
REACTIVO
•Sulfato de cobre 17 g
*citrato de sodio 173g
*carbonato de sodio 100g
*H2Od 1000 ml
TECNICA .
*en un tubo de ensayo colocar 3 ml de rvo benedict.
*8 gotas de orina
•Calentar po 2 minutos y dejar enfriar
LECTURA
Si la orina tiene glucosa se observa la formacion de precitado
rojo ladrillo , amarillo verdoso deacuerdo con la concectracio
de lgucosa
DETERMINACON CUANTITATIVA DE GLUCOSA
METODO FEHLING:
*sulfato de cobre.
*tartrato de sodio o potasio.
*solucion patron de glucosa al 1%.
*ferrocianuro de potasio al 5%.
•Reactivo cortonne.
TECNICA
*En frasco erlen meyer colocar 10ml de sulfato de cobre
*10ml de tartrato de sodio.
*5ml de ferrocianuro de potasio.
*10ml de agua destilada .
*calentar hasta hervir.
*agragr la orina hasta decoloracion y viraje brusco al pardo
CALCULO:
T/ml gastados ¨=gr de glucosa / ml
T= ml del titulo.
METODO BENEDICT
TECNICA.
*en frasco erlenmeyer colocar 25ml de reactivo.
*15 gramos de carbonato de sodio mas una pequeña cantidad
de talco.
*hervir hasta disolver.
*añadir una gota de orina manteniendo la ebullicion hasta la
reduccion total del reactivo aobetnido cuando desaparece el
color azul.
CALCULO:
•Si 25ml de reactivo --------- 50gr de glucosa
•V---------- volumen en ml gastados de orina.
•FORMULA
•50mg de glucosa /V= a gr de glucosa por 1000ml.
•LECTURA
•Dan falsos positivos :
-acido aminosalicilico.
-acido ascorbico.
-acido nalidixico.
-cefalotina.
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